Microscópios – Curso Preparatório Concurso Público: Biomédico | Bioquímico | Análises Clínicas

Conteúdo
Microscópios: tipos, partes e funções
Prof. Dr. Victor Proença
Tipos de Microscopia
 Microscopia de luz (óptica): detalhes de até 200 nanômetros
 Microscopia eletrônica: usam feixe de elétrons; lentes eletrostáticas e eletromagnéticas; nível de resolução de 0,2 nanômetros.
 Microscopia de ponta de prova
Microscopia de luz (óptica)
 Microscopia de campo claro
 Microscópio invertido
 Microscopia de campo escuro
 Microscópio ultravioleta
 Microscópio de fluorescência
 Microscópio de contraste de fase
 Microscópio de polarização

Microscopia de campo claro
Microscópio invertido
Microscopia de campo escuro
 Capta a luz que foi dispersa ou refratada pelas estruturas na amostra
 Aplicação: indicada para amostras com pouco contraste
Microscopia de contraste de fase
 Permite ajustar fase da luz = maior contraste; facilita visualização; cria contraste otimizado
 Vantagem = observar espécime sem precisar de coloração
 Utilização = analisar e observar o intercurso biológico das células vivas
 Estrutura = usa diafragma anular próximo ao condensador, entre objetivas e oculares
Microscópio de polarização
 Constituído por dois prismas – um polarizador e outro analisador
 Utilizado na observação de materiais birrefringentes (estruturas anisotrópicas, com índices diferentes de refração como os ossos, músculos, fibras, cabelos, etc.)
Microscópio ultravioleta e de fluorescência
 Aumento maior
 Possível analisar substâncias absorvidas pelos organismos estudados
 Fluorescência = uso de fluorocromos
Microscópio confocal
 Aumenta o contraste da imagem
 Constrói imagens tridimensionais
 Permite grande definição em amostras mais espessas
Microscopia eletrônica
 Transmissão: amplia até um milhão x; emissão de feixe de elétrons que interage com a amostra enquanto a atravessa
 Varredura: Imagens em alta resolução; amplia até 100 mil x; imagens tridimensionais; observação de superfícies

Questão 1
UFU-MG – 2018 – Biomédico
Em relação aos tipos de microscopia, assinale a alternativa correta.
Alternativas
A) Microscopia de contraste de fase utiliza filtros que induzem a saída de feixes unidirecionais de luz.
B) Na Microscopia eletrônica de transmissão, os elétrons não atravessam a amostra.
C) Microscopia confocal utiliza lasers para a excitação de moléculas fluorescentes.
D) Microscopia de luz polarizada é utilizada como rotina em cultivo de células.
Questão 1
Justificativa
A) Microscopia de contraste de fase utiliza filtros que induzem a saída de feixes unidirecionais de luz. – INCORRETA
Contraste de fase: Sistema de filtros (anéis de fase) interfere no trajeto da luz, criando um contraste de contorno claro e escuro em torno das estruturas celulares a partir de diferenças nesse trajeto
Microscópio de polarização: composto por dois discos polaroides ou primas posicionados entre a fonte de luz e o condensador; conduz a luz pelo filtro em apenas uma direção. Esta é polarizada em um plano conforme a mesma atravessa o primeiro filtro até atingir a amostra.
Em outras palavras, a luz polarizada – por não se propagar para todas as direções assim como a luz convencional – possibilita a análise em pedras, metais, plásticos, cristais, ossos, esmalte dentários, espermatozoides, DNA, entre muitos outros.

Questão 1
Justificativa
B) Na Microscopia eletrônica de transmissão, os elétrons não atravessam a amostra. – INCORRETA
Esta análise exige que as amostras sejam muito finas, para que o feixe de elétrons seja capaz de atravessá-las.
Questão 1
Justificativa
C) Microscopia confocal utiliza lasers para a excitação de moléculas fluorescentes. – CORRETA
 Permite a obtenção de imagens de alta resolução através de cortes ópticos, posteriormente agrupados para se fazer a reconstrução tridimensional da topografia de objetos complexos.
 Possibilita a eliminação de informações fora de foco da imagem, o que favorece a aquisição de amostras mais espessas, como biofilmes bacterianos, estruturas fúngicas, tecidos dentários e dentre outros tipos celulares
Questão 1
Justificativa
D) Microscopia de luz polarizada é utilizada como rotina em cultivo de células. – INCORRETO
 Microscópio invertido: permite a observação de células vivas, amostragem e manipulação de células, captura de imagens e observação de fluorescência.
 Microscópio de polarização: composto por dois discos polaroides ou primas posicionados entre a fonte de luz e o condensador; conduz a luz pelo filtro em apenas uma direção. Esta é polarizada em um plano conforme a mesma atravessa o primeiro filtro até atingir a amostra. Em outras palavras, a luz polarizada – por não se propagar para todas as direções assim como a luz convencional – possibilita a análise em pedras, metais, plásticos, cristais, ossos, esmalte dentários, espermatozoides, DNA, entre muitos outros.
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